Vízben oldódó vitamin. Főként az aminosavak és a zsírsavak lebontásában, a szöveti légzésben, az oxidatív funkciókban és a méregtelenítésben játszik szerepet, de fontos a nyálkahártyák épségéhez. Az emberi bélflóra termel B₂-vitamint, hiányállapotai így ritkán alakulnak ki. Bélflóra károsodás esetén, például széles-spektrumú antibiotikumokkal végzett kezelés miatt hiányállapota kialakulhat. Bizonyos mértékig a B₂-vitamin bevitele is arányos az energia felvétellel, bár nem annyira kifejezetten, mint a B₁-vitaminnál. Természetes forrásaink a tej és tejtermékek, a zöldség- és főzelékfélék, a húsok, a máj, vese, tojás és a gabonafélék. Hiányában bőr- és nyálkahártya elváltozások alakulnak ki, az ajkak és a szájüreg berepedezik, pikkelyesedik. Vízoldható vitamin lévén nem lehet túladagolni.

A napi szükséglet 1,7 mg (USA RDI alapján), 1,6 mg (EU RDA alapján), az OÉTI által elfogadott RDA szerint férfiak esetén 1,8 mg, míg nők esetén 1,5 mg, sportolók részére 3-4 mg lehet. A testépítő szakirodalomban, illetve az újabban végzett kutatások publikációiban lényegesen magasabb ajánlásokkal találkozhatunk, ami napi 50-100 mg-ot jelenthet. Nagyobb mennyiség egyszerre történő bevitele a vizeletet erősen sárgára színezi, viszketés, nyugtalanság léphet fel.